人脉络膜血管内皮细胞

培养步骤:
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。

      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

细胞分类：

一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是公司正在热销的相关产品：

 18.75pg/ml兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试盒293/hTLR5-HA

0.188ng/ml兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试盒293/hTLR6-HA

46.9pg/ml兔基质金属蛋白酶2/胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试盒293/mTLR1-TLR2

0.188ng/ml兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试盒 293/mTLR2-TLR6

0.094ng/ml兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA试盒293XL/hTLR7-HA

9.375pg/ml兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA试盒 293XL/hTLR8-HA

0.094ng/ml兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA试盒293XL/hTLR9-HA

0.094ng/ml兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试盒293/h

37.5pg/ml兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试盒293/hNOD2

0.094ng/ml兔溶菌酶(LZM)ELISA试盒 293/hTLR2
人脉络膜血管内皮细胞角蛋白1(KRT1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人脑胶质瘤细胞，A172细胞

α白蛋白(AFM)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人脑胶质细胞株(正常)，HEB细胞

白介素8受体β(IL8Rβ)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人脑微管内皮细胞，HBMEC细胞

岩藻糖基转移酶8(FUT8)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人脑星形胶质母细胞瘤，U-87 MG细胞

溶质载体家族16成员1(SLC16A1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人脑星形胶质母细胞瘤，U-118MG细胞

趋化因子C-C-基元受体5(CCR5)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肺成纤维细胞，HELF细胞

Canopy 2同源物(CNPY2)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肺成纤维细胞，MRC-5细胞

转醇酶(TKT)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肺成纤维细胞，WI-38细胞

肌球蛋白重链8(MYH8)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肾上皮包装细胞，GP2-293细胞

B-淋巴酪氨激酶(BLK)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肾上皮细胞，293A细胞

电压依性阴离子通道蛋白1(VDAC1)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肾细胞，293FT细胞

线粒体转录因子A(TFAM)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肾细胞，293T细胞

组织蛋白酶Z(CTSZ)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肾细胞，AD-293细胞

低氧诱导因子2α(HIF2α)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人皮肤T淋巴瘤细胞，HUT-102细胞

黄嘌呤脱酶(XDH)检测试盒(酶联免疫吸附试验法)人皮肤成纤维细胞，HSF细胞