跨膜蛋白49抗体

实验原理 :

（1）公司产品仅用于科研特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。

（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。

（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。

（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

（6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
商品详情：
英文名称：TMEM49

别    名:Vacuole membrane protein 1; DKFZP566I133; TDC1; TMEM49; Transmembrane protein 49; vmp1; VMP1_HUMAN.

研究领域:肿瘤  心血管  细胞生物  肿瘤细胞生物标志物  细胞自噬  细胞膜蛋白

抗体来源:Rabbit

克隆类型:Polyclonal

交叉反应:Mouse,  (predicted: Human, Rat, Pig, Horse, Rabbit, )

产品应用:WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蜡切片需做抗原修复）

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理论分子量:46kDa

细胞定位:细胞浆 细胞膜

性    状:Liquid

浓    度:1mg/ml

免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human TMEM49: 361-406/406 <Extracellular>

亚    型:IgG

纯化方法:affinity purified by Protein A

缓 冲 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

产品介绍:Vacuole membrane protein 1 (VMP1)/TMEM49 is a transmembrane protein localized to intracellular vacuoles and was discovered as a protein that promotes vacuole formation in acinar cells associated with acute pancreatitis (1). Over-expression of VMP1 promotes vacuole formation and subsequent cell death (1). Subsequent studies have shown that VMP1 expression is induced by starvation and the mTOR inhibitor, rapamycin, and can trigger autophagy (2). VMP1 is targeted, along with LC3, to autophagosome membranes (2). Knockdown of VMP1 can inhibit autophagosome formation (2). VMP1 interacts with Beclin-1, a key autophagy protein that activates the Class III PI3 kinase Vps34, which is regulated by a large network of associated proteins (3). VMP1 functions in the degradation and clearance of zymogen-containing vacuoles during experimental pancreatitis (4). During this process, VMP1 interacts with the ubiquitin protease USP9X, suggesting a possible functional link between the molecular machinery of autophagy and the ubiquitin pathway. Orthologues of VMP1 have been reported in C. elegans (known as EPG-3), Drosophila (known as TANGO-5), and Dictyostelium, and have been shown to play a role in membrane trafficking, orgenelle organization, and autophagy (5-7).

Stress-induced protein that, when overexpressed, promotes formation of intracellular vacuoles followed by cell death. May be involved in the cytoplasmic vacuolization of acinar cells during the early stage of acute pancreatitis. Plays a role in the initial stages of the autophagic process through its interaction with BECN1 (By similarity). Involved in cell-cell adhesion. Plays an essential role in formation of cell junctions.Sequence similarities: Belongs to the VMP1 family.

商品属性：

抗体的标记实验要点：

1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的会对化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
一抗和二抗的区别：

第一抗体就是平常所说的抗体，即能和抗原特异性结合。

第二抗体是能和抗体结合的，即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。

一抗是针对抗原的抗体，二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说，抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答，由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。

一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。

一抗：可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。

二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。

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