标本的采集与保存:
1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即
可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟,
取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
3、组织匀浆:
1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2 次)。
3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。
4、其它生物标本:请1000×g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
产品名称:小鼠锁链素)elisa检测试剂盒
英文名称: Mouse Desmosine ELISA Kit
规格 :48T/96T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
合
公司采用全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解;
补体的控制方法:
①用EDTA稀释标本;
②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;
2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;
控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。
以下是小鼠锁链素)elisa检测试剂盒的相关产品:
人骨骼肌成肌细胞裂解物人可溶性脂酶A2(sPL-A2)ELISA试盒
人肾小球内皮细胞裂解物人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试盒
人肾近曲小管上皮细胞裂解物人可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)ELISA试盒
人肾皮质上皮细胞裂解物人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试盒
人肾上皮细胞裂解物人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试盒
人肾系膜细胞裂解物人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试盒
人膀胱平滑肌细胞裂解物人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试盒
人尿道上皮细胞裂解物人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISA试盒
人膀胱基质成纤维细胞裂解物人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA试盒
人前列腺上皮细胞裂解物人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试盒
人前列腺成纤维细胞裂解物人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试盒
人前列腺平滑肌细胞裂解物人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试盒
人颅骨造骨细胞裂解物人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试盒
人滑膜细胞裂解物人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试盒
小鼠锁链素)elisa检测试剂盒人髓核细胞裂解物人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试盒 4-氟-3-基苯酸酯人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试盒
4-氟-2-基苯酸酯ELISA Kit for Human Myeloperoxidase
2-(4-基-1-嗪)苯胺人胃动素(MTL)ELISA试盒
3,4-二苄氧基苯酸酯ELISA Kit for Human Promotilin
4-三氧硅基联苯人基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA试盒
5-啶-3-(N-基)酰胺ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-9
3,4-二苄醇人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试盒
3,5-二-2,4,6-三氟啶ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-17
2,5-二对苯二酸二酯人小眼相关转录因子(MITF)ELISA试盒
6-三氟基-2-氧化吲哚ELISA Kit for Human Microphthalmia-associated transcription factor
4-氟-2-氧基苯酸人苹果酸脱酶2(MDH2)ELISA试盒
3--2,4,5,6-四氟啶ELISA Kit for Human Malate dehydrogenase, mitochondrial
1--2,6-二-4-氟苯人Myocardin(MYOCD)ELISA试盒
三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二基-3,5-辛二基)镨(Ⅲ)[核磁共振位移试]ELISA Kit for Human Myocardin
十二碳二酸二酯人髓脂性蛋白(MBP)ELISA试盒
ELISA 试验时,注意事项如下:
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值i大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入 。
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