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内质网α-甘露糖苷酶1抗体抗体分子标记技术

浏览次数:590发布日期:2023-05-18

内质网α-甘露糖苷酶1抗体抗体分子标记技术:


(一)原理


当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。


(二)准备


1.试剂


经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;


(三)操作要点


1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;


2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;


3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;


4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);


5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;


6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

phospho-ASK1 (Ser966)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体

phospho-ATXN1 (Ser775)磷酸化失调症蛋白1抗体

ATXN1/Ataxin-1脊髓小脑失调症蛋白1抗体

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

phospho-ASK1 (Ser967)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体

phospho-ASK1 (Thr845)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体

phospho-ATF2 (Thr69/71)磷酸化活化复制因子2抗体

Phospho-ATP1A1 (Tyr10)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体

Phospho-ATP1A1 (Ser16)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体

Acetyl CoA Carboxylase乙酰辅酶A羧化酶抗体

Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78)磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体

Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860)磷酸化Ack1抗体

phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体

phospho-AMPK beta 1 (Ser108)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体

phospho-ALK (Tyr1604)磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体

phospho-ATM(Ser1981)磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体

phospho-ATP citrate lyase (Ser455)磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体

phospho-ATR (Ser428)磷酸化ATR抗体

AMN1细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体

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ASF1A细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体

AGPHD1氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体


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