测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ATR抗体
去整合素样金属蛋白酶18抗体
活化转录因子6抗体
衔接蛋白β抗体
衔接蛋白γ/γ-Adaptin抗体
水通道蛋白-9抗体
膜粘连蛋白A3抗体
膜粘连蛋白 A4抗体
自噬相关蛋白8A抗体
磷酸化蛋白激酶B抗体
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
磷酸化蛋白激酶B抗体
脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体
蛋白激酶锚定蛋白13抗体
AP-1μ2抗体
肥大细胞膜抑制性受体Allergin1抗体
脑钠通道蛋白1抗体
肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚单位B1抗体
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体
甲胎蛋白抗体
毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
ATP结合盒转运蛋白2抗体
肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体
酸性钙调蛋白3抗体
磷酸化CD156b抗体
乙醇脱氢酶5抗体
乙醇脱氢酶6抗体
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