蛋白酶抑制剂混合物(用于哺乳动物)操作步骤

蛋白酶抑制剂混合物(用于哺乳动物)操作步骤:

1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。

b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。

c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。

2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。

3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。

5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。

6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。

7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。

大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glu)ELISA Kit，48T/96T

人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA Kit，48T/96T

小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)

大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)

人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA Kit，48T/96T

小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA Kit，48T/96T

大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA Kit，48T/96T

人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit，48T/96T

小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit，48T/96T

大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit，48T/96T

人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit，48T/96T

小鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit，48T/96T

大鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit，48T/96T

人红细胞生成素(EPO)ELISA Kit，48T/96T

小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA Kit，48T/96T

大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA Kit，48T/96T

人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T

小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T

猴E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T

大鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T

兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T