内酰胺酶大肠杆菌（大肠埃希氏菌）LAMP试剂盒使用方法

RT-超广谱RT-内酰胺酶大肠杆菌（大肠埃希氏菌）LAMP试剂盒使用方法:

一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。

1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。

3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品 DNA 的制备

7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。

8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。

三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。

柱式水样DNAout

柱式土壤DNAout

柱式微生物基因组DNAout

柱式细菌DNAout（50次）

病毒DNA提取

96孔板病毒DNAout(离心法)（1次）

96孔板病毒DNAout(离心法)（5次）

96孔板病毒DNAout(真空法)（见关联产品）

M13噬菌体单链基因组DNAout（见关联产品）

λ噬菌体DNAout（见关联产品）

一管式病毒DNA-RNAout

一管式病毒DNAout（200次）

一管式病毒DNAout（50次）

柱式病毒DNAout

经典法质粒DNA提取

96孔板质粒DNAout(离心法)

96孔板质粒DNAout(真空法)（见关联产品）

大提无内毒素质粒DNAout

大提无内毒素质粒DNAout

大提柱式Ti质粒DNAout（见关联产品）

大提柱式质粒DNAout

革氏阳性细菌质粒DNAout

中提柱式BAC DNAout

柱式BAC DNAout

柱式Ti质粒DNAout（见关联产品）

柱式酵母质粒DNAout

柱式无内毒素质粒DNAout

柱式质粒DNAout(50次)

一步法质粒DNA提取

一步法96孔板单菌落质粒DNAout（离心法）（停产）

一步法96孔板单菌落质粒DNAout（离心法）（停产）

一步法96孔板单菌落质粒DNAout（真空法）（见关联产品）

一步法96孔板质粒DNAout（离心法）

一步法96孔板质粒DNAout（真空法）（见关联产品）

一步法大提质粒DNAout