3-硝基酪氨酸检测试剂盒操作步骤

3-硝基酪氨酸检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA Kit

人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA Kit

人生长调节致癌基因α/黑素瘤生长刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA Kit

人成熟促进因子(MPF)ELISA Kit

人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)ELISA Kit

人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA Kit

人金属硫蛋白(MT)ELISA Kit

人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA Kit

人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA Kit

人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA Kit

人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA Kit

人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA Kit

人肝癌抗原(PHC)ELISA Kit

人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA Kit

人鼻咽癌(NPC)ELISA Kit

人膀胱癌抗原(UBC)ELISA Kit

人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA Kit

人癌基因蛋白质p190/bcr-abl ELISA Kit

人膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA Kit

人中期因子(MK)ELISA Kit

人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA Kit

人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit

人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA Kit

人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit

人克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA Kit

人低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA Kit

人黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA Kit

人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA Kit

人P53(P53)ELISA Kit

人细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA Kit