鸡17-酮类固醇（17-KS）elisa试剂盒操作步骤

鸡17-酮类固醇(17-KS)elisa试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

异维 A 酸；异维甲酸（I0800000

异麦芽酮糖醇（I0465000

异麦芽糖（Y0000070

异康唑（I0 75000

异环磷酰胺（I0060000

异环磷酰胺 杂质F（I0060012

异环磷酰胺 杂质E（I0060010

异环磷酰胺 杂质B（I0060004

异环磷酰胺 杂质A（I0060002

异环磷酰胺 - 对照谱图（I0060100

异氟醚（Y0000858

异氟醚 - 对照谱图（Y00000 7

异丙托溴铵（I0 60000

异丙托溴铵 杂质B（I0 61000

异丙托溴铵 杂质A（Y0000276

乙二醇水杨酸酯（H1429400

胰腺粉(淀粉酶和脂肪酶 BRP（P0100000

胰腺粉 (蛋白酶 BRP（P0200000

依沙美肟（Y0000227

伊维菌素（I8000010

伊曲康唑（I7000000

伊拉地平（Y0000 66

伊拉地平 杂质D（Y0000 67

一氧化氮 - 参考谱图（N09 0000

叶绿酸0 4605

叶绿酸0 4601

叶绿素C2（需干冰运输0 46 A

叶绿素C （需干冰运输0 464A

叶绿素A（需干冰运输0 461A

野漆树甙18280-025

氧托溴铵（Y0000709

氧托溴铵 杂质D（Y000071 

氧托溴铵 杂质B（Y0000715

氧可酮 杂质D（Y00005 

氧氟沙星（O0120000

氧氟沙星 杂质E（O0120050

氧氟沙星 杂质A（O0120010

盐酸左旋咪唑（L0 80000