PCR扩增试剂盒使用后可扩增出多条DNA片段

　　PCR扩增试剂盒是从克隆有ThermuaquaticusDNAPolymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后，再经三次过柱纯化分离出来的一个约94KD的重组蛋白。无外源核酸酶和细菌DNA污染，稳定性好，特异性强，适用于各种PCR扩增。本试剂盒已经包括了PCR扩增使用的各种试剂，便于客户配套使用。使用本制品扩增得到的PCR产物的3'端附有一个A碱基，因此可直接克隆于T-Vector中。

　　所谓多重PCR（MultiplexPolymeraseChainReaction，mPCR），也称复合PCR，由Chambehian'在1988年提出（Chambehian'et.al.NucleicAcidsRes.1988Dec9;16(23):11141–11156.），基本原理与常规PCR相同，区别在于多重PCR的反应体系是加入多对引物，各对引物分别结合在模板的相应位置，扩增出多条DNA片段。

　　PCR扩增试剂盒实验注意事项：

　　1.进行PCR反应前，可以将所有gDNA的浓度稀释到同一浓度，并转移到PCR8联管中，一方面是便于排枪操作，另一方面是加入相同起始量的gDNA，这样可以降低文库的浓度差异，便于混合文库。

　　2.大多数情况下引物是1管，操作相当方便；当目标区域是外显子或者是其他连续区域时，我们会把引物分装为2管，分别命名PrimerpoolT1与PrimerpoolT2，这时需要第二轮PCR前把产物合并，再进行下一步反应。

　　3.执行多重PCR反应时，特别是样本量多的情况下，可以将T1设为一组，T2设为一组，便于制备反应试剂混合液和排枪操作；并把解冻好的试剂放置在冰盒上，在冰盒上进行加样操作。

　　4.在实验中，可以在PCR管壁上和管盖上同时进行反应编号标记，防止高温或其他原因导致记号消失，避免后续产物混合操作失误，造成样本交叉污染。

　　5.第二轮PCR后，因为YFBufferB试剂比较粘稠，在清洗纯化的时候不能吸走所有试剂，可以剩余5-10μl，否则会把磁珠一起吸走，造成样品的损失，导致产物回收率下降。