PCR扩增试剂盒实验时的几大事项说明
浏览次数：1078发布日期：2020-10-21
PCR扩增试剂盒提供DNA扩增所需要的基本试剂。DNA扩增时，用户需要自行准备模板和扩增所需要的引物。高温嗜热Pfu DNA聚合酶主要用于对保真度要求非常高的DNA扩增，这些扩增要求扩增的产物中不能出现突变等错误。
PCR扩增试剂盒实验事项：
1.样本上PCR平台可做的样本包括血液，唾液，口腔拭子，在实验中，对于DNA投入量要求不是很高，根据不同项目需求，DNA投入量的范围在100pg到100ng之间。
2.进行PCR反应前，可以将所有gDNA的浓度稀释到同一浓度，并转移到PCR8联管中，一方面是便于排枪操作，另一方面是加入相同起始量的gDNA，这样可以降低终文库的浓度差异，便于混合文库。
3.大多数情况下引物是1管，操作相当方便；当目标区域是外显子或者是其他连续区域时，把引物分装为2管，需要第二轮PCR前把产物合并，再进行下一步反应。
4.执行多重PCR反应时，特别是样本量多的情况下，可以将T1设为一组，T2设为一组，便于制备反应试剂混合液和排枪操作；并把解冻好的试剂放置在冰盒上，在冰盒上进行加样操作。
5.实验中，可以在PCR管壁上和管盖上同时进行反应编号标记，防止高温或其他原因导致记号消失，避免后续产物混合操作失误，造成样本交叉污染。
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