创伤弧菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒样品DNA的制备

创伤弧菌探针法荧光定量PCR检测试剂盒样品DNA的制备

1.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。。也可以选购本公司的一管式病毒
DNAOUT或其升级版柱式病毒 DNAOUT。本试剂盒免费赠送15次DNA病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAOUT的成分)。
稀释阳性对照(以10E2-10E7这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行
干万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只
提供可以直接使用的长为86bp的DNA段作为阳性对照。
2.标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2
3用带芯枪头分别加入45L模板稀释液(用带芯枪头,下同
4.在7号管中加入5uL1x10E8持贝L的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝L的阳性对照。放冰上待用。5.换枪
头,在6号管中加入5uL1×10E7拷贝L的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝μ的阳性对照。放冰
6换枪头,在5号管中加入5uL1×10E6拷贝L的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝L的阳性对照
放冰上待用。
7换枪头,在4号管中加5uL1x10E5拷贝L的阳性对照到4号管中,得1×10E4拷贝L的阳性对照。放冰上待用
8.重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置qPCR反应(20L体系,在样品制备室进行
9.在PCR管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且
阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后后加)注意事项